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CCK-8試劑盒的檢測步驟及使用注意事項(xiàng)介紹

  • 發(fā)布日期:2023-02-07      瀏覽次數(shù):1414
    •   CCK-8試劑盒的檢測步驟及使用注意事項(xiàng)介紹 
        CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的四唑鹽——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臜染料。
        CCK-8試劑盒的檢測步驟:
        1、向各孔中加入100μl細(xì)胞懸液。
        2、在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。
        3、向各孔中加入各濃度的待測溶液10μl。
        4、37℃下孵育。
        5、向各孔中加入10μl的CCK-8溶液。
        6、37℃下孵育1-4小時(shí)。
        7、測定450nm處的OD值。
        CCK-8試劑盒的使用注意事項(xiàng):
        (1)使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。
        (2)建議使用CO2培養(yǎng)箱過夜預(yù)培養(yǎng)。
        (3)使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。
        (4)如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μlCCK-8進(jìn)行檢測。
        (5)白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
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